1. 新建細胞系/株以及新型細胞基質。

2. 某些傳代細胞已證明在一定代次內不具有成瘤性，而超過一定代次則具有成瘤性（如Vero）。

3. 用于疫苗生產的細胞系/株應進行成瘤性檢查，但當未經遺傳修飾的二倍體細胞被證明無成瘤性后，可以不作為常規檢查要求。

注：已證明具有成瘤性的傳代細胞（如BHK21，CHO，C127等），或細胞類型屬成瘤性細胞（如雜交瘤細胞等），用于生產治療性產品時可以不再做成瘤性檢查。

目前使用比較廣泛的成瘤性檢查方法有動物接種法（體內）和軟瓊脂克隆形成實驗（體外）。其中，體內法為評價的標準，但對某些細胞而言，體外法的結果也可以作為細胞成瘤性檢查的參考，尤其是低代次、在動物體內無成瘤性的傳代細胞系。

將待檢測細胞接種于皮下或者肌肉內注射。至少觀察16周接種部位是否有進行性結節形成，對出現的結節開始消退的動物，應在觀察期末處死。不能形成進行性結節的細胞，不視為具有成瘤性。通常用 HeLa 或 HeLa S3細胞或其他已知成瘤性細胞作陽性對照，且對照組至少設10只動物，試驗才視為有效。在觀察期末，處死所有動物，對注射部位及其他部位 (如心臟、肺、肝、脾、腎、腦及局部淋巴結)進行觀察和組織病理學檢查，判斷是否有接種細胞增生，進一步判定接種細胞是否形成腫瘤或有轉移瘤。

使用低熔點瓊脂模擬細胞在體內的微環境培養細胞，通常使用其它已知具有成瘤性的細胞作為陽性對照，對照組與實驗組同步操作。常規培養3周左右，培養過程中可視情況適當地補充細胞培養液，直到陽性組在顯微鏡下明顯觀察到大量細胞集落，培養終止。使用4%多聚甲醛固定，結晶紫染色，在顯微鏡下觀察并拍照記錄。

歐洲EMA、美國FDA以及WHO針對干細胞、體細胞、成體干細胞、轉基因細胞、基因治療產品以及生產用動物細胞培養物等發布了多項指導原則。EMA在《人體細胞醫療產品的指導原則》中表示“如果可以預見細胞轉化風險則應該展開成瘤性研究，重點檢測其增殖能力以及染色體完整性”，在《干細胞醫療產品反思文件》中提到“多能干細胞和體干細胞都存在腫瘤形成風險，培養條件可能會嚴重影響干細胞的基因組的不穩定，延長細胞培養有助于評估成瘤性和染色體穩定性”。

 FDA指導原則認為控制hESC衍生的細胞產品中未分化的ESC或其他細胞雜質水平是成瘤性風險評價的主要方面，采用細胞增殖測定法和軟瓊脂集落形成法測定惡性轉化細胞，以檢測最終產品中的雜質細胞是否超過了最小腫瘤產生劑量。FDA還重點討論了臨床前實驗物種的選擇和動物模型的預測能力，以評估植入細胞到達移植部位微環境中是否形成腫瘤，以及引起宿主細胞和植入細胞在各組織器官中發生腫瘤轉化的風險。