珈創生物 —— 生物技術服務與研發為一體的高新技術企業
優質高效透明
High quality, efficient and transparent
細胞治療產品來源多樣、生物學特性復雜。間充質干細胞、NK細胞、CAR-T細胞、誘導多功能干細胞等不同類別細胞治療產品的生產過程都會涉及細胞的離體培養。而細胞離體培養必然會涉及生物學屬性的變化、生物學安全性改變、外源性污染、交叉污染等問題，這些問題嚴重影響研發初始到生產過程的進展和成功。
根據《細胞治療產品研究與評價技術指導原則》、《人源性干細胞產品藥學研究與評價技術指導原則（試行）》、《基因修飾細胞治療產品非臨床研究與評價技術指導原則（試行）》等指南要求，研究者需建立各類細胞治療產品質量控制策略。質量控制一般應考慮鑒別、生物學效力、純度、雜質、細胞數量（活細胞數、功能細胞數等）和一般安全性檢測（如無菌、支原體、內毒素、外觀、除細胞數之外的其他外源性異物等）等。同時也要根據細胞治療產品特性，質量研究和檢查應涵蓋細胞特性分析、特定病毒和非特定病毒檢測、病毒載體回復突變（復制性病毒檢測）、生物學活性（明確產品與臨床治療相關的生物學效應和作用機制）等。
珈創生物可提供細胞基因療法（CGT）產品的綜合質量檢測服務。
針對如間充質干細胞產品這類非基因編輯細胞治療產品，珈創生物可提供：
1、微生物學安全性檢測，建立從原輔料、起始原物料（如生產用細胞、菌毒種等）到產品的各方面質量安全控制方案，確保各類細胞及細胞產品滿足無細菌、真菌、支原體、病毒污染，以及無微生物代謝產物污染的質量要求；
2、生物學安全性檢測，建立風險預測或排除細胞治療產品進入人體后產生成瘤性、異常免疫反應、分化等安全性問題；
3、生物學屬性檢測，如細胞鑒別、活性、純度和均一性等生物學屬性評價，降低各類細胞治療產品因其本身具有的多樣性、異質性、復雜性等特點帶來的風險；
4、生物學有效性檢測，如誘導分化能力、免疫學反應、相關活性物質分泌等來預測臨床治療效應。
針對如CAR-T細胞這類基因編輯的免疫細胞治療產品，除上述一般性的細胞質量控制檢項外，還需考慮生產質粒的菌種，質粒、慢病毒以及特殊生產工藝中引入的其他風險，如慢病毒載體回復突變（RCL檢測）、對靶細胞的效應、分泌特定因子、工藝相關雜質（磁珠等）和產品相關雜質（如非功能雜細胞群等）檢測等。
珈創生物細胞治療產品技術服務檢測項目總表
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序號 |
類別(產品/項目/參數) |
產品/項目/參數 |
依據的標準（方法）名稱及編號（含年號） |
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序號 |
名 稱 |
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1 |
細胞鑒別試驗 |
1.1 |
同工酶試驗 |
生物制品生產檢定用動物細胞基質制備及檢定規程《中國藥典》2020年版三部， 生物制品生產檢定用菌毒種管理及質量控制、 生物制品生產檢定用動物細胞基質制備及質量控制、生物制品病毒安全性控制《中國藥典》2020年版三部 Code of Federal Regulation Title 9（9 CFR） Guidance for Industry :Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications |
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1.2 |
染色體核型分析法 |
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1.3 |
STR分析法 |
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1.4 |
細胞形態觀察法 |
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1.5 |
細胞表面標記物檢測--流式細胞術 |
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1.6 |
DNA條形碼法 |
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1.7 |
種屬鑒定-- PCR法 |
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1.8 |
RAPD法（隨機擴增多態性DNA） |
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2 |
無菌檢查 |
2.1 |
細菌、真菌無菌檢查--薄膜過濾法 |
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2.2 |
細菌、真菌無菌檢查--直接接種法 |
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2.3 |
分枝桿菌檢查法 |
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3 |
支原體檢查 |
3.1 |
支原體檢查--瓊脂培養法 |
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3.2 |
支原體檢查--液體培養法 |
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3.3 |
支原體檢查--DNA染色法 |
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4 |
內、外源病毒因子檢查 |
4.1 |
細胞形態觀察及血吸附試驗 |
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4.2 |
體外不同指示細胞接種培養法 |
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4.3 |
動物體內接種法 |
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4.3.1 |
乳鼠腦內及腹腔接種法 |
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4.3.2 |
小鼠腦內及腹腔接種法 |
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4.3.3 |
豚鼠腹腔接種法 |
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4.3.4 |
家兔皮內及皮下接種法 |
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4.4 |
雞胚接種法 |
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4.4.1 |
雞胚卵黃囊接種法 |
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4.4.2 |
雞胚尿囊腔接種及尿囊液血凝試驗 |
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4.5.1 |
逆轉錄病毒檢測--逆轉錄酶活性測定法 |
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4.5.2 |
逆轉錄病毒檢測--透射電鏡觀察法 |
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4.5.3 |
逆轉錄病毒檢測--感染性試驗 |
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4.5.4 |
逆轉錄病毒樣顆粒定量--透射電鏡法 |
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4.5.5 |
逆轉錄病毒樣顆粒定量--Q-PCR法 |
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4.6.1 |
鼠源性病毒檢測--細胞試驗 |
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4.6.2 |
鼠源性病毒檢測--動物抗體產生試驗 |
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4.6.3 |
鼠源性病毒檢測--雞胚感染試驗 |
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4.6.4 |
鼠源性病毒檢測--Q-PCR法 |
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4.7.1 |
人源病毒檢測--免疫熒光法 |
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4.7.2 |
人源病毒檢測--Q-PCR法 |
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4.8.1 |
牛源性病毒檢測--細胞培養法 |
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4.8.2 |
牛源性病毒檢測--熒光抗體檢測法 |
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4.8.3 |
牛源性病毒檢測--Q-PCR法 |
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4.9.1 |
鼠細小病毒檢測--細胞培養法 |
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4.9.2 |
鼠細小病毒檢測--Q-PCR法 |
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4.10.1 |
豬源性病毒檢測--細胞培養法 |
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4.10.2 |
豬源性病毒檢測--熒光抗體檢測法 |
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4.10.3 |
豬源性病毒檢測--Q- PCR法 |
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4.11.1 |
杯狀病毒（Vesivirus 2117）檢測--Q- PCR法 |
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5 |
成瘤性檢查 |
5.1 |
動物體內接種法 |
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5.2 |
軟瓊脂克隆形成試驗 |
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5.3 |
端粒酶活性檢測--Q-PCR法 |
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6 |
致瘤性檢查 |
6.1 |
動物體內接種法 |
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7 |
免疫學反應檢測 |
7.1 |
淋巴細胞增殖抑制試驗 |
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7.2 |
特定淋巴細胞亞群檢測法（Th1,Th17,Treg） |
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7.3 |
淋巴細胞分泌TNF-α抑制試驗 |
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8 |
生物學有效性評價 |
8.1 |
成骨細胞分化試驗 |
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8.2 |
成軟骨細胞分化試驗 |
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8.3 |
成脂細胞分化試驗 |
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9 |
細胞活性檢測 |
9.1 |
細胞計數和細胞存活率檢測法 |
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9.2 |
細胞生長曲線測定法 |
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9.3 |
細胞周期測定--PI染色法 |
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10 |
殘留物檢測 |
10.1 |
牛血清白蛋白殘留檢測法 |
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10.2 |
抗生素殘留檢測--培養法 |
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10.3 |
抗生素殘留檢測--酶聯免疫法 |
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10.4 |
磁珠殘留 |
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10.5 |
Human IL-2殘留 |
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11 |
噬菌體污染檢查 |
11.1 |
透射電鏡觀察--負染色法 |
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11.2 |
培養觀察--噬斑法 |
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12 |
菌種鑒定 |
12.1 |
菌株染色觀察--普通染色法 |
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12.2 |
菌株染色觀察--革蘭氏染色法 |
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12.3 |
菌落形態觀察-培養法 |
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12.4 |
菌株抗生素抗性試驗-培養法 |
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12.5 |
菌株生化特征分析--生化反應試驗 |
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12.6 |
16SrRNA分析法 |
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12.7 |
18SrRNA分析法 |
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12.8 |
26SrRNA分析法 |
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12.9 |
ITS序列分析法 |
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13 |
細菌內毒素檢測 |
13.1 |
凝膠法 |
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14 |
可復制型病毒檢測 |
14.1 |
復制性逆轉錄病毒檢測--細胞培養和 Q- PCR法 |
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14.2 |
復制性慢病毒檢測--細胞培養和 Q- PCR/ELISA法 |
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15 |
細胞制劑檢測 |
CAR+T細胞比例 CD3+細胞比例 生物學活性 磁珠殘留 Human IL-2殘留 NK細胞自然殺傷活性檢測 NK細胞ADCC功能檢測 NK激活性和抑制性受體檢測GzmB,perforin,CD107表達水平檢測 |
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16 |
其他檢測項目 |
流式細胞術的絕對細胞計數方法 CCK-8法則定細胞群體倍增時間 細胞克隆形成率檢測方法 MSC急性毒性及抗GVHD效果評價 基于RPA-cas技術的口腔支原體檢測 基于LAMP技術的肺炎支原體的可視化檢測 Lb-cas12a蛋白的原核表達及純化 基于CRISPRCas系統的多種支原體核酸檢測 mRNA含量ribogreen熒光檢測 mRNA疫苗總抗體滴度ELISA檢測法 mRNA疫苗中和抗體效價假病毒中和試驗檢測法 dsRNA雜質ELISA檢測法 馬源性病毒檢查（3種） 禽源性病毒檢查（3種） 昆蟲細胞CO1條形碼分析法 昆蟲細胞螺原體qPCR檢測 昆蟲桿狀病毒檢測 昆蟲黃病毒檢測 昆蟲諾達病毒檢測 昆蟲彈狀病毒（內源性/外源性）檢測 SV40大T抗原核酸序列檢測 腺病毒5型EIA基因檢測 胎畸瘤形成試驗 |
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